ОЦІНКА ЕФЕКТИВНОСТІ РЕФОЛДІНГА РЕКОМБІНАНТНОГО БІЛКА SPAА ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE
О. М. Дерябін
Робота присвячена оптимізації схеми ренатурації рекомбінантного білка SPAА(tr) Erysipelothrix rhusiopathiae для отримання його в антигенно- та імуногенноактивній формі.
Показано, що найбільш ефективна експресія білка відбувалася при використанні аутоіндукцїі. Ефективний рефолдінг білка SPAА(tr) досягнутий шляхом контрольованого зниження концентрації денатуруючого реагента, зміни складу буфера для ренатурації та оптимізації параметрів хроматографічного процесу. Чистота препарату рекомбінантного білка становила понад 90 %.
Антигенна специфічність рекомбінантно відтвореного білка SPAА доведена в серологічних тестах (імуноблотинг, непрямий варіант ІФА) з поліклональними антитілами до музейних штамів Erysipelothrix rhusiopathiae та з моноспецифічною сироваткою кролів на рекомбінантний білок SPAА(tr) і лізатами культур штамів Erysipelothrix rhusiopathiae різних серотипів.
Ключові слова: БЕШИХА, РЕКОМБІНАНТНИЙ БІЛОК SPAА, РЕФОЛДІНГ, ІММОБІЛІЗАЦІЙНА МЕТАЛАФІННА ХРОМАТОГРАФІЯ, АНТИТІЛА
