БІОЛОГІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ КЛІТИН ПЕРВИННОЇ ПУХЛИНИ МИШЕЙ C57BL/6 З ПЕРЕЩЕПЛЕНОЮ КАРЦИНОМОЮ ЛЕГЕНЬ ЛЬЮІС ЗА ВПЛИВУ АЛОГЕННИХ МЕЗЕНХІМАЛЬНИХ СТОВБУРОВИХ КЛІТИН
Л.В.Кладницька1, А. Й. Мазуркевич1, Л. В. Гарманчук2, С. В. Величко1, В. В. Нікуліна2, 4, Т. В. Ніколаєнко2, В. В. Ковпак1, О. І. Дасюкевич3, О. В. Скачкова2, А. О. Павлюкова1
kladlarisa@ukr.net
1Національний університет біоресурсів і природокористування України,
вул. Героїв Оборони, 15, Київ, 03041, Україна
2Національний університет імені Тараса Шевченка, ННЦ «Інститут біології», проспект академіка Глушкова, 2, Київ, 03022, Україна
3Інститут експериментальної патології, онкології та радіології ім. Р. Е. Кавецького, вул. Васильківська, 45, Київ-22, 03022, Україна
4Національний інститут раку, МОЗ України, вул.Ломоносова, 33/43, м. Київ,
03022, Україна
Мета дослідження — вивчення біологічних властивостей клітин первинної пухлини мишей C57BL/6 з перещепленою карциномою легень Льюіс за впливу алогенних мезенхімальних стовбурових клітин (МСК).
Досліди проводили на самцях мишей C57BL/6 2–3-місячного віку, масою 20–22 г. Алогенні мезенхімальні стовбурові клітини отримували культивуванням первинного матеріалу, що був виділений з кісткового мозку мишей С57BL/6. Культивування клітин проводили за 37°С, 100 % вологості і 5 % СО2 у середовищіDMEM із додаванням 20 % фетальної сироватки телят та 1 % антибіотика-антимікотика. Мишам внутрішньом’язово інокулювали клітинну суспензію метастатичної карциноми легень Льюїс (LLC) у концентрації 1х106/0,1 мл розчина Хенкса. Після інокуляції пухлинних клітин миші були розділені на контрольну і дослідну групи по 8 тварин у кожній. Мишам дослідної групи на 8-й день після інокуляції пухлинних клітин вводили внутрішньовенно алогенні МСК 4-го пасажу в кількості 1,25x104. На 20-ту добу від початку досліду визначали рівень анеуплоїдії та розподіл клітин первинної пухлини за фазами клітинного циклу методом проточної цитофлуориметрії. Встановлено, що застосування алогенних МСК на 8-му добу після перещеплення метастатичної карциноми легенів Льюїс призводить до збільшення вмісту анеуплоїдних клітин в 1,3 рази в первинній пухлині і становить у мишей дослідної групи 76,68±1,99*** при р<0,001, тоді як у мишей, яким не вводили МСК — 59,20±0,80 %. Вплив МСК на збільшення показника анеуплоідії клітин пухлинної тканини підтверджує дисперсійний аналіз — ɳ2х=0,86 при р<0,001. За впливу алогенних МСК змінюється розподіл пухлинних клітин за фазами клітинного циклу. Зокрема, за впливу алогенних МСК підтверджено вірогідне зростання кількості анеуплоідних клітин проліферативного пулу (S+G2/M) первинної пухлинної тканини до 68,02±3,42* проти цього показника тварин контрольної групи 56,17±2,90 % (р<0,05). Рівень апоптозу пухлинних клітин за впливу МСК вірогідно знижується і становить 41,82±1,37 % (р<0,001), проти 56,59±0,92 % тварин контрольної групи, що підтверджено дисперсійним аналізом — ɳ2х=0,88 при р<0,001.
Ключові слова: АЛОГЕННІ МЕЗЕНХІМАЛЬНІ СТОВБУРОВІ КЛІТИНИ, ФАЗИ КЛІТИННОГО ЦИКЛУ, АПОПТОЗ, АНЕУПЛОІДІЯ, ПРОТОЧНА ЦИТОФЛУОРИМЕТРИЯ, КАРЦИНОМА ЛЕГЕНЬ ЛЬЮІС
