ВИЗНАЧЕННЯ СПЕЦИФІЧНОСТІ ТА ВАЛІДАЦІЯ РОЗРОБЛЕНИХ ПЛР-ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ ДІАГНОСТИКИ ХЛАМІДІОЗІВ СВІЙСЬКИХ М’ЯСОЇДНИХ
Т. М. Цівенко, І. М. Ксьонз
ctm_vet@ukr.net, igor.ksyonz@ukr.net
Інститут свинарства і агропромислового виробництва НААН,
вул. Шведська Могила, 1, м. Полтава, 36013, Україна
Приведено результати з визначення аналітичної специфічності й валідація ПЛР-тест-систем власної розробки для індикації бактерій роду Сhlamydia у біологічних зразках відібраних від кішок і собак. Розроблені ПЛР-тест-системи включають пари олігонуклеотидних праймерів, що фланкують ділянки ДНК генів МОМР Сhlamydiafelis і RNasePRNAChlamydiaabortus, Chlamydiapecorum та Chlamydiapsittaci. Метою досліджень було визначення аналітичної специфічності розроблених ПЛР-тест-систем для діагностики хламідійних інфекцій свійських м’ясоїдних та їх валідація.
Валідація тест-систем власної розробки проводилась методом порівняння з іншими ПЛР-тест-системами для індикації та видової диференціації бактерій роду Сhlamydia.
Матеріалом для тестування служили 19 зразків біологічного матеріалу (контрольні ДНК C.felis,C. abortus, C. pecorum і C. psittaci, а також ізоляти хламідій, виділених із епітеліальних зіскрібків слизових оболонок кон’юнктиви, піхви, препуцію, 20% суспензій біоптатів внутрішніх органів свійських собак і кішок, а також фекалій та епітеліальних зіскрібків зі слизової оболонки прямої кишки диких м’ясоїдних родин котячих та собакових).
Аналіз електрофореграм продуктів ампліфікації зазначених біологічних зразків, отриманих при застосуванні двох розроблених тест-систем і трьох інших ПЛР-тест-систем для індикації бактерій роду Сhlamydia, а також мультиплексної ПЛР-тест-системи для диференціації хламідій за видами, свідчить про їх повну відповідність.
Результати досліджень підтверджують специфічність зазначених діагностикумів і, відповідно, можливість їх застосування для діагностики хламідійних інфекцій свійських м’ясоїдних.
Ключові слова: ХЛАМІДІОЗИ, СВІЙСЬКІ М’ЯСОЇДНІ, ПЛР-ТЕСТ-СИСТЕМА, ОЛІГОНУКЛЕОТИДНІ ПРАЙМЕРИ, МОМР, RNASEPRNA
