БІОТЕХНОЛОГІЧНА МОДЕЛЬ ОДЕРЖАННЯ ЗАРОДКІВ КРОЛІВ IN VITRO З ВИКОРИСТАННЯМ НАНОМАТЕРІАЛУ
О. В. Щербак, С. І. Ковтун, А. Б. Зюзюн, О. С. Осипчук
Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам необхідно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.
Інститут розведення і генетики тварин імені М. В. Зубця НААН, вул. Погребняка, 1,
с. Чубинське, 08321, Бориспільський р-н, Київська обл., Україна
Розроблено та застосовано біотехнологічну модель одержання ембріонів кролів in vitro з використанням наноматеріалу для удосконалення технології репродукції сільськогосподарських тварин. Показано позитивний вплив наноматеріалу на основі високодисперсного кремнезему (ВДК) та іммобілізованого на його поверхні D-галактозаміну на мейотичне дозрівання ооцитів кролів в умовах in vitro. Встановлено, що рівень дозрівання ооцитів in vitro за таких умов становить 87,1 %. Для дослідження повноцінності дозрівання invitro ооцитів проведено їх осіменіння епідидимальними сперматозоїдами кроля (вилучені із хвостової частини придатка сім’яника). Рівень дроблення ембріонів сягав 52,1 %. Встановлено, що через 120 годин культивування до стадії ранньої морули розвинулось 17,0 % ембріонів. Для додаткової оцінки in vitro біологічної активності 0,001% концентрації ВДК/D-галактозаміну було застосовано епідидимальні сперматозоїди кроля. Показано, що після перебування сперматозоїдів у середовищі з додаванням 0,001 % концентрації ВДК/D-галактозамін упродовж 15 хвилин відбулося зниження рухливості гамет на 5,0 % з збереженням такого рівня упродовж трьох годин. Загальний час виживаності сперматозоїдів без додавання наноматеріалу сягав дев’яти годин, а з ним — не перевищував восьми годин. Додавання ВДК/D-галактозаміну до середовища до концентрації 0,001 % спричиняло швидке насичення рецепторів клітинної поверхні сперматозоїдів цим наноматеріалом, що в свою чергу призвело до зниження їх рухливості до 35 %. Але на такому рівні рухливість сперматозоїдів зберігалась довше, порівняно з контролем, що особливо важливо для підвищення рівня запліднення яйцеклітин in vitro. Встановлено перспективність проведення подальших біотехнологічних досліджень з використанням наноматеріалів на основі ВДК та біомолекул у системі збереження та раціонального використання генетичних ресурсів сільськогосподарських тварин.
Ключові слова: КРОЛІ, ООЦИТ-КУМУЛЮСНІ КОМПЛЕКСИ, НАНОМАТЕРІАЛ, ВИСОКОДИСПЕРСНИЙ КРЕМНЕЗЕМ, D-ГАЛАКТОЗАМІН, МОРФОЛОГІЧНИЙ АНАЛІЗ, ЦИТОГЕНЕТИЧНИЙ АНАЛІЗ, ЕПІДИДИМАЛЬНІ СПЕРМАТОЗОЇДИ, ЕМБРІОНИ, ЗАПЛІДНЕННЯ INVITRO