Завантажити повний текст статті у PDF

Nipot O. E., Ershova N. A., Fedosova S. M., Chabanenko O. O., Ershov S. S., Shpakova N. M. Study of the characteristics of cryopreservation of rabbit and canine erythrocytes using the cryoprotectant DMSO. Bìol Tvarin. 2025; 27 (2): 3–6. DOI: 10.15407/animbiol27.02.003.
https://doi.org/10.15407/animbiol27.02.003
Received 04.02.2025 ▪ Revision 19.05.2025 ▪ Accepted 23.05.2025 ▪ Published online 10.06.2025

Дослідження особливостей кріоконсервування еритроцитів кролика та собаки за допомогою кріопротектора диметилсульфоксид

О. Є. Ніпот¹, Н. А. Єршова¹, С. М. Федосова², О. О. Чабаненко¹, С. С. Єршов¹, Н. М. Шпакова¹
Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам необхідно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

¹Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, вул. Переяславська, 23, м. Харків, 61016, Україна
²Харківський національний університет імені В. Н. Каразіна, майдан Свободи, 4, м. Харків, 61022, Україна

Переливання крові та її компонентів використовується у ветеринарії як при невідкладних станах, так і при хронічних хворобах. Тривале збереження еритроцитів тварин допоможе формувати банки крові й швидше реагувати на клінічні потреби. Метою роботи було дослідження рівня пошкодження еритроцитів кролика та собаки за умов їх кріоконсервування при різних концентраціях проникного кріопротектора диметилсульфоксиду (ДМСО) (7,5% і 10%) і при використанні двох об’ємів зразка, що заморожується (2 мл і 10 мл). Результати показали, що для еритроцитів обох видів ссавців рівень пошкодження є меншим при меншому об’ємі зразка та при більшій концентрації кріопротектора. Але є певні особливості, пов’язані з видом. Так ДМСО в концентрації 7,5% зовсім не захищає еритроцити кролика, але забезпечує захист від 45% до 60% еритроцитів собаки, залежно від об’єму зразка (10 мл і 2 мл відповідно). Концентрація ДМСО 10% забезпечує захист від 35% до 76% еритроцитів кролика і від 64% до 73% еритроцитів собаки для зразків 10 мл та 2 мл відповідно. Ці дані свідчать про те, що досліджуваний кріопротектор є більш ефективним для еритроцитів собаки, ніж кролика, й об’єм зразка значно менше впливає на рівень загального пошкодження цих еритроцитів. Отримані дані свідчать про актуальність розробки адаптованих протоколів кріоконсервації з урахування видових особливостей еритроцитів тварин.

Ключові слова: еритроцити ссавців, ДМСО, кріоконсервація, об’єм зразка, Oryctolagus cuniculus, Canis lupus familiaris

1. Denysova OM, Yakymenko TI, Vashenko BB, Zhegunov GP, Prichodchenko VO, Gladka NI. The methods of cryopreservation of red blood cells of animal. Vet Sci Technol Anim Husb Nat Managem. 2018; 2: 65–69. DOI: 10.31890/vttp.2018.02.18. (in Ukrainian)
2. Hu Y, Liu X, Ahmad A, Chen J, Chen X, Zhang W, Tan S. Cryoprotectants for red blood cells: Evaluate safety and effectiveness by in vitro MedComm Future Med. 2023; 2 (4): e67. DOI: 10.1002/mef2.67.
3. Hu Y, Liu X; Ekpo MD, Chen J, Chen X, Zhang W, Zhao R, Xie J, He Y, Tan S. Dimethylglycine can enhance the cryopreservation of red blood cells by reducing ice formation and oxidative damage. Int J Mol Sci. 2023; 24 (7): 6696. DOI: 10.3390/ijms24076696.
4. Klbik I, Čechová K, Milovská S, Rusnák J, Vlasáč J, Melicherčík M, Mat’ko I, Lakota J, Šauša O. Cryoprotective mechanism of DMSO induced by the inhibitory effect on eutectic NaCl crystallization. J Phys Chem Lett. 2022; 13 (48): 11153−11159. DOI: 10.1021/acs.jpclett.2c03003.
5. Korbetska OO. Influence diameter straw and regime of their thawing on activity enzyme in process cryopreservation boar sperm. Bìol Tvarin. 2013; 15 (2), 71–75. Available at: https://aminbiol.com.ua/index.php/archive/92-archive/bt2-15-2013/1579-influence-diametr-straw-and-regime-of-their-thawing-on-activity-enzyme-in-process-cryopreservation-boar-sperm (in Ukrainian)
6. Kovalenko GV, Kovalenko IF, Linnik TP. The mechanism of DMSO, glycerol and ethylene glycol transport across rat and rabbit erythrocyte membranes. J Karazin Kharkiv Nat Univer Ser Biol. 2009; 878 (10): 109–116. Available at: http://seriesbiology.univer.kharkov.ua/ukr/10(2009)/pdf/109.pdf
7. Liu J, Christian JA, Critser JK. Canine RBC osmotic tolerance and membrane permeability. Cryobiol. 2002; 44 (3): 258–268. DOI: 10.1016/S0011-2240(02)00032-9.
8. Murray KA, Gibson MI. Chemical approaches to cryopreservation. Nat Rev Chem. 2022; 6 (8): 579–593. DOI: 10.1038/s41570-022-00407-4.
9. Nguyen TT, Nguyen HTQ, Dinh KN. Evaluation of stored whole blood and monitoring the health of dogs after transfusion using fresh whole blood, stored whole blood, and packed red blood cells. World Vet J. 2024; 14 (2): 220–227. DOI: 10.54203/scil.2024.wvj27.
10. Pervushina OA, Denysova ON, Zhegunov GF, Gladka NI, Prichodchenko VO, Yakimenko TI. Transfusion of canine cryopreserved red blood cells in treatment of babesiosis. Bìol Tvarin. 2018; 20 (3): 77–83. DOI; 10.15407/animbiol20.03.077. (in Ukrainian)
11. Pogozhykh D, Pakhomova Y, Pervushina O, Hofmann N, Glasmacher B, Zhegunov G. Exploring the possibility of cryopreservation of feline and canine erythrocytes by rapid freezing with penetrating and non-penetrating cryoprotectants. PLoS One. 2017; 12 (1): e0169689 DOI: 10.1371/journal.pone.0169689.
12. Ramakant, Sarkar TK, Verma AK, Thakur V, Maurya PK, Gautam S, Varun VK, Deepak D. Clinical significance of blood transfusions in animals: A review. Agric Rev. 2023; R-2638: 1–7. DOI: 18805/ag.R-2638.
13. Ulizko P, Bobrova O, Nardid O, Vodopyanova L, Repina S. New cryoprotective media for cryopreservation of mammal erythrocytes. Trakia J Sci. 2019; 4: 303–307. https://doi.org/10.15547/tjs.2019.04.001.
14. Zhegunov GF, Denisova ON. Permeability of mammalian erythrocytes for the molecules of glycerol and DMSO and the level of cellular viability after freezing-thawing. Rep NAS Ukr. 2010; 12: 139–143. (in Ukrainian)