Біологія тварин

ВПЛИВ ТІОТРІАЗОЛІНУ У СКЛАДІСЕРЕДОВИЩА ДЛЯ КРІОКОНСЕРВУВАННЯ СПЕРМИ ПСІВ НА ЦІЛІСНІСТЬ ПЛАЗМАТИЧНИХ МЕМБРАН ТА ЗБЕРЕЖЕНІСТЬ АКРОСОМ СПЕРМІЇВ ПІСЛЯ РОЗМОРОЖУВАННЯ

А.Р. Корбецький, М.М. Шаран

Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. Вам необхідно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

Інститут біології тварин НААН,
вул. В. Стуса, 38, м. Львів, 79034, Україна

У статті наведено результати досліджень впливу різних концентрацій тіотриазоліну у складі середовища для кріоконсервування сперми псів (2, 4, 6, 8, 10 та 12мг/мл) у порівнянні з середовищем без додавання тіотриазоліну. Вивчено зміни активності сперміїв, цілісності плазматичних мембран, збереженості акросом і виживаності сперміїв за різної концентрації тіотріазоліну в середовищі для заморожування сперми псів. Використали еякуляти дев’яти клінічно здорових статевозрілих псів різних порід. У результаті проведених досліджень встановлено, що тіотриазолін у концентрації 2 та 4 мг/мл не спричинив вірогідного зростання активності сперміїв після розморожування порівняно з контролем. Встановлено, що збільшення концентрації тіотріазоліну до 6 мг/мл призвело до вірогідного зростання (р˂0,05) активності сперміїв псів після розморожування на 7,6 % порівняно з контролем. Подальше збільшення концентрації тіотріазоліну (8, 10 та 12 мг/мл) у складі середовища для заморожування сперміїв спричинило зростання активності сперміїв псів після розморожування з високою вірогідністю (р˂0,001) порівняно з контролем, однак між ними не спостерігалось вірогідної різниці, що вказує на відсутність позитивного впливу тіотріазоліну на активність сперміїв псів після розморожування при збільшенні концентрації з 8 до 12 мг/мл. За збільшення концентрації тіотріазоліну у середовищі до 10 та 12мг/мл спостерігалося зниження кількості сперміїв з неушкодженою плазматичною мембраною на 11,7 та 14,3 % (р˂0,001) відповідно. Вивчаючи показник виживаності сперміїв після розморожування в середовищах з різною концентрацією тіотріазоліну, спостерігався позитивний вплив тіотріазоліну, вже починаючи з концентрації 4мг/мл, де значення цього показника було на 6,9 % вище (р<0,05) відносно контролю.

Ключові слова: СПЕРМА, ПЕС, КРІОКОНСЕРВУВАННЯ, ЦІЛІСНІСТЬ ПЛАЗМАТИЧНИХ МЕМБРАН, ЗБЕРЕЖЕНІСТЬ АКРОСОМ, ТІОТРИАЗОЛІН

1. Kharuta H. H., Sheremeta V. I. The impact of biologicaly active substances on sperm longevity and fertilizing capacity. The Animal Biology, 2012, vol. 14, no. 1–2, pp. 639−644. (in Ukrainian)
2. Witte T. S., Scha fer-Somi S. Involvement of cholesterol, calcium and progesterone in the induction of capacitation and acrosome reaction of mammalian spermatozoa. Anim. Reprod. Sci., 2007, 102, pp. 181–193. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2007.07.007
3. Sherhyn N. P. Biochemistry of domestic animal spermatozoa. Moscow, 1967. p. 239. (in Russian)
4. Heber U., Tyankova L., Santarius K. A. Stabilization and inactivation of biological membranes during freezing in the presence of amino acids. Biochem. Biophys. Acta, 1971, 241, pp. 578–592. https://doi.org/10.1016/0005-2736(71)90056-3
5. Nauk V. A. Structure andf unction sperm domestic animals at cryopreservation.Kyshynev, 1991,198 p. (in Russian)
6. Ponglowhapan S., Esse’n-Gustavsson B., Linde-Forsberg C. Influence of glucose and fructose in the extender during long-term storage of chilled canine semen. Theriogenology, 2004, 62, pp. 1498–517. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2004.02.014
7. Savchenkova L. V., Fylatov D. A., Belousova Y. P. Clinical pharmacology of thiotriazolin. Ukrainian Medical Almanac, 2008, vol. 11, no. 3, pp. 212–216. (in Ukrainian)
8. Belay Y. M. The effect of new drug thiotriazolin on lipid metabolism and lipid peroxidation under experimental atherosclerosis. Collection of Scientific Works “Current Issues of Pharmaceutical and Medical Science and Practice”, Zaporizhya, 1997, vol. 1, pp.183–187. (in Russian)
9. Vyzyr V. A., Voloshyna Y. N., Voloshyn N. A., Mazur Y. A., Belenychev Y. F. Metabolic cardioprotectors: pharmacological properties and clinical application. Methodic recommendations. Zaporizhya, 2006, pp. 36. (in Russian)
10. Vizir A. D., Hryhoryeva Z. Ye., Polivoda S. V. New antioxidant thiotriazolin in complex theatment of patients with chronic heart ischemia. Medicine, 1994, no. 5–6, pp.80–84. (in Ukrainian)
11. Nothling J. O., Shuttleworth R. The effect of straw size, freezing rate and thawing rate upon post-thaw quality of dog semen. Theriogenology, 2005, 63, pp. 1469–1480. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2004.07.012
12. Korbetskyy A. R. Morphological semen evaluation by phase-contrast microscopy. Scientific and technical bulletin of the Institute of Animal Biology and State Scientific-Research Control Institute of Veterinary Medicinal Products and Feed Additives, 2006, vol. 7, no. 3, 4, pp. 236–240. (in Ukrainian)
13. Kuznetsov A. V., Gnaiger E. Laboratory Protocol Lactate Dehydrogenase. Cytosolic marker enzyme Mitochondrial Physiology Network, 2010, V. 08.18, pp. 1–8.
14. Upreti G. C., Payne S. R., Duganzich D. M. Enzyme leakage during cryopreservation of ram spermatozoa. Animal reproduction science, 1996, vol. 41, 1, pp. 27–36. https://doi.org/10.1016/0378-4320(95)01442-X
15. Lax Y., Rubinstein S., Breitbart H. Acrosin activity assay for the evaluation of mammalian sperm acrosome reaction. Methods Mol. Biol., 2004, 253, pp. 135–140. https://doi.org/10.1385/1-59259-744-0:135
16. Kennedy W. P., Kaminski J. M., Vander Ven H. H. A simple, clinical assay to evaluate the acrosin activity of human spermatozoa. J. Androl., 1989, May-Jun, 10 (3), pp. 221–231. https://doi.org/10.1002/j.1939-4640.1989.tb00092.x
17. Belenychev Y. F.,Hancheva O. V. Patol. 2004, vol. 1, no. 1, pp. 15–26.
18. Byelenichev I. F., Stets V. R., Mazur I. A. Exper. physiol. ta biochemistry. 2002, no. 1, pp. 7–11.

скачати повний текст статті в форматі PDF